肝癌是中國第二大腫瘤致死病因，近年來國內(nèi)每年因肝癌死亡人數(shù)達(dá)數(shù)十萬。

據(jù)國家癌癥中心發(fā)布的數(shù)據(jù)顯示，作為乙肝大國，我國每年新發(fā)肝癌人數(shù)約占全世界50%左右，每年有數(shù)10萬的終末期肝癌病人。60歲以下人群中，肝癌仍是最常見和致死率最高的腫瘤。

在現(xiàn)有的診斷和治療水平下，中國肝癌患者5年的總體生存率不足20%。盡管當(dāng)前，我國肝癌臨床研究和臨床實(shí)踐已處于領(lǐng)先的地位，但在新藥研發(fā)和創(chuàng)新治療手段方面仍與歐美國家存在差距，在改善肝癌患者生存率方面仍面臨巨大挑戰(zhàn)。

傳統(tǒng)中醫(yī)藥療法是我國的特色治療方式，應(yīng)用范圍廣。我國傳統(tǒng)名貴藥材靈芝，具有補(bǔ)益五臟、止咳平喘、養(yǎng)肝護(hù)肝、補(bǔ)氣安神的功效，藥理作用十分廣泛。靈芝三萜作為靈芝的主要活性成分之一，常用于腫瘤的輔助治療。已有研究表明，靈芝三萜能夠增強(qiáng)紫杉醇對(duì)乳腺癌細(xì)胞增殖的抑制和凋亡作用，抑制異種移植瘤生長。

▍靈芝孢子油抑制肝癌細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡

在研究靈芝三萜預(yù)防及治療肝癌的課題上，我國學(xué)者鄭州市第七人民醫(yī)院藥學(xué)部主管藥師蔡蕤通過研究靈芝三萜對(duì) HepG2 人肝癌細(xì)胞增殖、 凋亡及 Wnt/β-catenin 信號(hào)通路的影響，發(fā)現(xiàn)：靈芝三萜能夠通過Wnt/β-catenin 信號(hào)通路調(diào)節(jié)c-myc（癌基因）、cyclinD1（G1/S-特異性周期蛋白-D1）、caspase-3、caspase-8蛋白表達(dá)，抑制肝癌細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。該研究成果發(fā)表在著名期刊《中成藥》上。

研究人員分別通過MTT和流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞增殖和凋亡，用Western?blot檢測(cè)c-myc（癌基因）、cyclinD1（G1/S-特異性周期蛋白-D1）、caspase-3、caspase-8、β?catenin、 p?GSK?3β蛋白表達(dá)。其實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：

①靈芝三萜濃度越高

不同濃度靈芝三萜分別作用 HepG2 肝癌細(xì)胞 24、48、72 h，靈芝三萜抑制 HepG2 細(xì)胞增殖 ( P＜0. 05) ，且濃度越高，抑制作用越強(qiáng)。見表 1

不同濃度靈芝三萜對(duì)肝癌細(xì)胞增殖的影響

與對(duì)照組比較，靈芝三萜組細(xì)胞凋亡率增加 (P＜0.05)，且濃度越高細(xì)胞凋亡越多，見表2。100μg/mL靈芝三萜對(duì)HepG2細(xì)胞增殖的抑制作用和細(xì)胞凋亡的促進(jìn)作用最強(qiáng)，選取100μg/mL靈芝三萜進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

不同濃度靈芝三萜對(duì)肝癌細(xì)胞凋亡的影響

③靈芝三萜影響

與對(duì)照組比較，靈芝三萜(100μg/mL)作用HepG2細(xì)胞24、48、72h，c-myc、cyclinD1蛋白表達(dá)下調(diào) (P＜0.05)，caspase-3、caspase-8蛋白表達(dá)上調(diào)(P＜0.05)，見圖1、表3。

靈芝三萜影響肝癌細(xì)胞增殖、凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)

④靈芝三萜影響

與對(duì)照組比，靈芝三萜 (100μg/mL) 作用HepG2細(xì)胞 24、48、72 h，β-catenin、p-GSK-3β 蛋白表達(dá)下調(diào) (P＜0.05) 。提示100 μg/mL 靈芝三萜可能影響肝癌細(xì)胞中 Wnt/β-catenin信號(hào)通路。見圖2、表 4。?

靈芝三萜對(duì)Wnt/β-catenin信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)的影響

⑤Wnt/β-catenin信號(hào)通路

Wnt/β-catenin信號(hào)通路對(duì)肝癌細(xì)胞增殖、凋亡的影響